有求必应
1、周期短，一般都是控制在25个工作日之内完成。
2、多年病毒包装经验。
首页>实验服务>细胞生物学技术服务>病毒包装服务>慢病毒包装（一）——过表达慢病毒【插入片段小于3Kb】
一、服务简介：
1、慢病毒简介：
慢病毒（lentivirus）是一种逆转录病毒，因为其在宿主体内需要很长的一段潜伏期，才导致宿主发病，所以被称之为慢病毒。
2、慢病毒的组成成分：
（1）病毒结构蛋白gag、pol和env：
gag基因编码病毒的核心蛋白如核衣壳蛋白、内膜蛋白和衣壳蛋白；
pol基因编码病毒复制相关的酶；
env基因编码病毒包膜糖蛋白。
（2）病毒调节蛋白rev、tat：
rev主要参与蛋白调节的表达水平，
tat参与蛋白转录的控制，与病毒的长末端重复序列（long terminal repeats, LTRS），
结合后促进病毒的所有基因的转录。
（3）四个辅助蛋白，即vif、vpr、vpu、nef，帮助病毒包装完成。
3、慢病毒载体：
（1）慢病毒载体是以慢病毒为主要骨架，用目的基因取代慢病毒的部分基因组构建而成。
（2）最经典的慢病毒载体是由HIV病毒改造而来。除了HIV病毒系统以外还有猿类免疫缺陷病毒（simian immunodeficiency virus, SIV）载体系统、猫免疫缺陷病毒（felines immunodeficiency virus, FIV）载体系统等。
二、载体构建、慢病毒包装和细胞株建立的流程：
1、获取目的基因：
（1）目的基因一般由客户直接提供。
（2）如果目的基因需要构建，载体构建需要单独收费，收费标准请参照载体构建部分。
2、选择合适的载体：
根据客户的要求，选择合适的载体。
3、构建重组载体：
将目的基因插入到载体上。
4、鉴定重组载体：
用测序或荧光定量等方法鉴定重组载体正确。
5、用无内毒素质粒抽提试剂盒提取重组载体：
一定要用低内毒素和无内毒素的提取试剂盒，高内毒素会导致包装失败。
推荐使用的提取试剂盒如下：
6、用重组载体和辅助包装载体转染293FT细胞：
一般使用电转系统，推荐的电转系统有：
7、收集上清液，通过超滤和超速离心纯化病毒：
超滤管推荐以下品牌：
8、使用纯化后的病毒感染293T细胞，通过药物筛选，获得稳定表达的细胞系：
